目的 研究L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达的影响.方法 构建EGFP-野毒株核壳蛋白、L60V、I97L变异核壳蛋白表达载体,酶切和测序鉴定,克隆扩增后转染HepG2细胞,筛选阳性细胞株;荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,Western blotting检测核壳蛋白的表达RT-PCR检测HLA-A mRNA的表达,流式细胞术观察HLA-A蛋白的表达.结果 成功建立了融合表达蛋白表达载体;荧光显微镜显示细胞内融合蛋白表达,Western blotting检测各细胞系蛋白表达的量基本相同RT-PCR和流式细胞术结果表明,与野毒株相比I97L变异核壳蛋白表达细胞株HLA-A mRNA和蛋白表达均上调(P＜0.05),而L60V变异核壳蛋白表达细胞株则均明显下调(P＜0.05).结论 L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达与野毒株核壳蛋白的影响不尽相同,其在功能上与野毒株核壳蛋白存在差异.
作者：李发武；卢放根
来源：中国人兽共患病学报 2007 年 23卷 5期
