目的 克隆表达弓形虫RH株SAG3基因,为深入研究其结构及功能奠定基础.方法 从弓形虫RH株基因组DNA中特异性扩增出编码SAG3基因的片段,相应酶切后克隆入原核表达载体pET-30a(+)中,构建pET-SAG3重组质粒.将pET30-SAG3重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株.经EcoRⅠ、 HindⅢ酶切及测序鉴定后,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达情况.结果 体外扩增的SAG3基因片段与目的片段大小相符约1155bp,成功构建了重组表达质粒pET30-SAG3, SDS-PAGE、 Western blot显示SAG3-His融合蛋白的分子量大小约为50kd.结论 弓形虫表面抗原SAG3基因在大肠杆菌中成功表达,为进一步研究SAG3的结构和功能奠定基础.
作者：陈莎丽；覃珊珊；张玉英；李娟兰；金小宝；朱家勇；江钢锋；汪琦
来源：中国人兽共患病学报 2008 年 24卷 6期
