目的 探讨迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda, E.tarda)溶血相关基因(E.tarda haemolysin activator gene,eha)基因调控该菌毒力基因的作用.方法 利用自杀质粒pHM5,缺失E.tarda的eha基因,得到△eha缺失菌株,再构建△eha株的互补菌株.通过平板溶血性法、接触溶血法、上清溶血法,观察野生株、△eha缺失株与及互补株溶血性的差异.利用MTT法比较三种细菌培养物的过滤液对Vero细胞的毒性的差别.利用H2O2抗性纸片扩散法,比较三种菌对过氧化氢抵抗力的差异.利用RT-PCR和SDD-PAGE电泳超速酸化离心法提取的鞭毛蛋白,比较三种细菌鞭毛基因的转录和表达的差异.结果 △eha缺失株和互补株不溶血,而野生株溶血.eha基因的缺失降低E.tarda菌对过氧化氢的抵抗力,△eha缺失株较野生株的细胞毒性明显减弱,eha基因可以调控迟缓爱德菌鞭毛基因的转录和表达.结论 eha基因可以调控迟缓爱德华菌毒力基因的表达,是一个毒力调控基因.
作者：郑恩金；高大庆；洪捷；陆承平
来源：中国人兽共患病学报 2010 年 26卷 11期
