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目的 构建及鉴定合有人乳头瘤病毒(human papillomavirus.HPV) 18型E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7.方法 以HPV18型全基因质粒为模板,PCR扩增HPV18 E6、E7基因,克隆到痘苗病毒转移载体pSC65中,获得重组转移载体pSC65-HPV18 E6、E7.重组转移载体转化大肠杆菌,挑取孤立菌落PCR初步筛选.选择阳性菌落提取质粒,酶切及测序鉴定.结果 阳性菌落质粒酶切结果显示有340bp、500 bp大小的目的基因片段,表明为重组转移载体.测序结果证实重组转移载体包含HPV18 E6、E7基因.结论 成功构建包含HPV18 E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7,研究结果为进一步构建包含HPV18 E6、E7基因的重组痘苗病毒奠定基础.

作者:王雪莲;张晓娇;赵峰;安春丽

来源:中国人兽共患病学报 2012 年 28卷 6期

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作者:
王雪莲;张晓娇;赵峰;安春丽
来源:
中国人兽共患病学报 2012 年 28卷 6期
标签:
人乳头瘤病毒 痘苗病毒 转移载体pSC65
目的 构建及鉴定合有人乳头瘤病毒(human papillomavirus.HPV) 18型E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7.方法 以HPV18型全基因质粒为模板,PCR扩增HPV18 E6、E7基因,克隆到痘苗病毒转移载体pSC65中,获得重组转移载体pSC65-HPV18 E6、E7.重组转移载体转化大肠杆菌,挑取孤立菌落PCR初步筛选.选择阳性菌落提取质粒,酶切及测序鉴定.结果 阳性菌落质粒酶切结果显示有340bp、500 bp大小的目的基因片段,表明为重组转移载体.测序结果证实重组转移载体包含HPV18 E6、E7基因.结论 成功构建包含HPV18 E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7,研究结果为进一步构建包含HPV18 E6、E7基因的重组痘苗病毒奠定基础.