目的 建立一种快速、高效的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测粪样中美洲钩虫虫卵.方法 根据美洲钩虫ITS基因序列,设计4条LAMP引物,建立LAMP检测法.利用LAMP法检测日本血吸虫、肝吸虫、鞭虫、猪蛔虫、蛲虫的DNA样本以验证LAMP方法的特异度.以美洲钩虫成虫DNA样本,倍比稀释以评价LAMP法的DNA最低检出量.现场采集55份人粪DNA样本,采用改良加藤法、LAMP法和普通PCR方法同时检测,评价LAMP法的敏感性和特异性.结果 LAMP法可特异性扩增美洲钩虫DNA样本.LAMP法可检测最低DNA浓度为1.2fg/mL.通过现场样本对LAMP进行评价,LAMP法敏感性相对于改良加藤法和PCR法分别是95.24%和100%.特异性分别是97.06%和100%.结论 建立起以虫卵为检测材料的检测美洲钩虫病的LAMP法,为美洲钩虫病提供特异、敏感、高效的检测方法.
作者:危芙蓉;朱慧慧;贾孝凯;汪俊云
来源:中国人兽共患病学报 2020 年 36卷 7期