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目的 建立内脏利什曼病液滴式数字PCR检测方法,将其与同时建立的实时荧光定量 PCR检测方法进行方法学比较,探究其在内脏利什曼病诊断方面的价值.方法 以杜氏利什曼原虫小环动基体 DNA(kinetoplast DNA,kDNA)为分子靶标,根据其约 200 bp的保守片段设计引物和探针,建立内脏利什曼病液滴式数字PCR检测方法,比较其与实时荧光定量PCR检测方法的检测限、精密度以及在不同利什曼原虫虫株中的检测效果.结果 液滴式数字 PCR检测下限与实时荧光定量PCR检测下限相同,约为 1.0×10 copies/μL;随待测样本浓度的降低(1.0×104 copies/μL~1.0×10 copies/μL),液滴式数字PCR检测方法变异系数呈增大趋势(12.07

作者:陈维琳;侯杰;王念;马莹

来源:中国人兽共患病学报 2023 年 39卷 10期

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作者:
陈维琳;侯杰;王念;马莹
来源:
中国人兽共患病学报 2023 年 39卷 10期
标签:
利什曼原虫 液滴式数字PCR 实时荧光定量PCR Leishmania droplet digital PCR real-time PCR
目的 建立内脏利什曼病液滴式数字PCR检测方法,将其与同时建立的实时荧光定量 PCR检测方法进行方法学比较,探究其在内脏利什曼病诊断方面的价值.方法 以杜氏利什曼原虫小环动基体 DNA(kinetoplast DNA,kDNA)为分子靶标,根据其约 200 bp的保守片段设计引物和探针,建立内脏利什曼病液滴式数字PCR检测方法,比较其与实时荧光定量PCR检测方法的检测限、精密度以及在不同利什曼原虫虫株中的检测效果.结果 液滴式数字 PCR检测下限与实时荧光定量PCR检测下限相同,约为 1.0×10 copies/μL;随待测样本浓度的降低(1.0×104 copies/μL~1.0×10 copies/μL),液滴式数字PCR检测方法变异系数呈增大趋势(12.07