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目的:探讨解整合素样金属蛋白酶8(a disintegrin and metalloprotease domain 8,ADAM8)基因对结肠癌HCT8细胞增殖及增殖信号转导途径PI3 K-Akt-mTOR的影响。方法体外培养结肠癌HCT8细胞,构建含ADAM8基因过表达质粒载体和ADAM8基因RNA干扰质粒载体;转染至HCT8细胞,分为过表达组、干扰组和对照组。采用EdU和MTS方法检测细胞增殖情况,PI3K酶活检测试剂盒检测细胞内PI3K酶活,Western Blot方法检测细胞内Akt、p-Akt相对表达量和mTOR的表达量。结果过表达组细胞增殖能力(1.22±0.13)显著高于对照组(1.00±0.12)(P<0.05),干扰组细胞增殖能力(0.78±0.11)显著低于对照组(1.00±0.12)(P<0.05)。与对照组相比,过表达组和干扰组细胞内 PI3 K的酶活变化差异无统计学意义。ADAM8过表达后细胞内 p-Akt 和mTOR表达量均增加,干扰表达后p-Akt和mTOR表达量均降低。结论 ADAM8可通过增强 Akt的磷酸化和 mTOR的表达促进HCT8细胞增殖。

作者:白杨;陈浩;李纪政;黄进团;杨祖立

来源:中国生化药物杂志 2014 年 3期

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作者:
白杨;陈浩;李纪政;黄进团;杨祖立
来源:
中国生化药物杂志 2014 年 3期
标签:
解整合素样金属蛋白酶8 结肠癌 免疫印迹 干扰表达 a disintegrin and metalloprotease domain 8 colon carcinoma immunoblotting interference expression
目的:探讨解整合素样金属蛋白酶8(a disintegrin and metalloprotease domain 8,ADAM8)基因对结肠癌HCT8细胞增殖及增殖信号转导途径PI3 K-Akt-mTOR的影响。方法体外培养结肠癌HCT8细胞,构建含ADAM8基因过表达质粒载体和ADAM8基因RNA干扰质粒载体;转染至HCT8细胞,分为过表达组、干扰组和对照组。采用EdU和MTS方法检测细胞增殖情况,PI3K酶活检测试剂盒检测细胞内PI3K酶活,Western Blot方法检测细胞内Akt、p-Akt相对表达量和mTOR的表达量。结果过表达组细胞增殖能力(1.22±0.13)显著高于对照组(1.00±0.12)(P<0.05),干扰组细胞增殖能力(0.78±0.11)显著低于对照组(1.00±0.12)(P<0.05)。与对照组相比,过表达组和干扰组细胞内 PI3 K的酶活变化差异无统计学意义。ADAM8过表达后细胞内 p-Akt 和mTOR表达量均增加,干扰表达后p-Akt和mTOR表达量均降低。结论 ADAM8可通过增强 Akt的磷酸化和 mTOR的表达促进HCT8细胞增殖。