目的：建立重组人干扰素α2 b原液中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证，用于对该产品的质量控制。方法通过wako DNA提取试剂盒提取干扰素原液中的宿主残留DNA，再利用SYBRGreen染料法对样品和标准DNA进行定量PCR测定，根据标准曲线对样品中的DNA残留量分析。对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性的验证，同时对企业提供的3批干扰素原液中的残留 DNA 测定。结果该方法检测假单胞菌基因组 DNA 的最低准确定量浓度可达12 fg／μL， DNA 含量在12 fg／μL～120 ng／μL范围内线性良好，标准曲线的相关系数r＝0．998； wako DNA提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50％～200％范围内；该方法检测3批干扰素原液的DNA残留量均低于标准限度，符合《中国药典》三部2010年版和2015年版中关于假单胞菌产重组人干扰素α2 b原液中宿主DNA残留量的要求。结论 wako DNA提取试剂盒能解决干扰素原液中样品前处理的技术难点，与定量PCR法结合能够简便、快速、准确地对干扰素原液中残留的DNA定量测定。
作者：苏喆；周朝东；黄哲甦；尉然
来源：中国生化药物杂志 2016 年 36卷 4期
