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背景及目的抑郁症发病机制不清.结构影像、遗传、神经生化的研究都从不同角度阐述了抑郁症的发病机制,种种证据也显示抑郁症的发病在脑代谢层面是有其器质性基础的,但至今还无明确、统一的结论.蛋白质组学技术为抑郁症发病机制的研究提供了新的手段.本研究通过建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳和质谱鉴定技术,分析海马组织差异蛋白质表达,旨在探索抑郁症新的治疗靶点,为建立客观的诊断、治疗、停药指标提供线索.方法以雄性成年SD大鼠10只,采用慢性不可预见的轻度应激(chronic unpredictable mild stress ,CUMS)制作抑郁症模型.将动物予以夹尾1 min、禁水24 h、禁食24 h、45℃环境5 min、昼夜颠倒24 h、水平振荡30 min (160次/min) 、4℃冰水游泳5 min ,7种刺激每天随机采取1种,共安排3周.经行为学测试:蔗糖水试验和旷野试验(open-field test)评估模型后,三氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马组织蛋白质,以固相pH梯度双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色后,应用Image Master 2D软件进行图像分析.胰蛋白酶胶内消化,进行MALDI-TOF-MS质谱分析,将得到的质谱数据,去除主要干扰峰后,检索NCBI数据库,鉴定蛋白质.结果 10只大鼠应激后兴趣和快感明显缺乏,活动减少,模型建立成功.双向电泳图谱分辨率高,重复性好.抑郁组

作者:牟君;杨泽松;杨德兰;吕发金;罗天友;谢鹏

来源:中国神经精神疾病杂志 2006 年 32卷 3期

知识库介绍

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作者:
牟君;杨泽松;杨德兰;吕发金;罗天友;谢鹏
来源:
中国神经精神疾病杂志 2006 年 32卷 3期
标签:
抑郁症 蛋白质组学 双向凝胶电泳 海马 质谱鉴定
背景及目的抑郁症发病机制不清.结构影像、遗传、神经生化的研究都从不同角度阐述了抑郁症的发病机制,种种证据也显示抑郁症的发病在脑代谢层面是有其器质性基础的,但至今还无明确、统一的结论.蛋白质组学技术为抑郁症发病机制的研究提供了新的手段.本研究通过建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳和质谱鉴定技术,分析海马组织差异蛋白质表达,旨在探索抑郁症新的治疗靶点,为建立客观的诊断、治疗、停药指标提供线索.方法以雄性成年SD大鼠10只,采用慢性不可预见的轻度应激(chronic unpredictable mild stress ,CUMS)制作抑郁症模型.将动物予以夹尾1 min、禁水24 h、禁食24 h、45℃环境5 min、昼夜颠倒24 h、水平振荡30 min (160次/min) 、4℃冰水游泳5 min ,7种刺激每天随机采取1种,共安排3周.经行为学测试:蔗糖水试验和旷野试验(open-field test)评估模型后,三氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马组织蛋白质,以固相pH梯度双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色后,应用Image Master 2D软件进行图像分析.胰蛋白酶胶内消化,进行MALDI-TOF-MS质谱分析,将得到的质谱数据,去除主要干扰峰后,检索NCBI数据库,鉴定蛋白质.结果 10只大鼠应激后兴趣和快感明显缺乏,活动减少,模型建立成功.双向电泳图谱分辨率高,重复性好.抑郁组