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目的 探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对大鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响及其受体途径.方法 将原代培养的大鼠腹腔巨噬细胞分为对照组、CRH组、CRH受体(CRHR)1选择性阻断剂CP-154526+CRH组(简称CP+CRH组)、CRHR1/2非选择性阻断剂α-helical CRH9-41+CRH组(简称HL+CRH组)以及蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89+CRH组(简称H89+CRH组)5组.对照组仅加入新鲜RPMI l640培养液2 mL培养;CRH处理组加入1×10-9mol/L CRH培养液2 mL;后3组分别加入含CP-154526(5×10-4 mol/L)、α-helical CRH9-41(1×10-6 mol/L)以及H89(1×10-6 mol/L)培养基预孵育2 h,然后加入CRH使培养液CRH终浓度为1×10-9 mol/L.各组分别于CRH刺激后0.5、1、2、4、8 h收集培养皿中上清液,应用ELISA法检测IL-6水平. 结果对照组巨噬细胞分泌IL-6维持在低水平.CRH组巨噬细胞分泌IL-6在2 h时增加,达(7.7±0.741)μg/g prot,高于同一时点的对照组(P<0.05),4 h时达高峰[(16.60±3.94)μg/g prot],接近同时相点对照组的3倍(P<0.01).CP+CRH组巨噬细胞IL-6分泌量在2、4 h时下降非常显著,与同时点CRH组比较分别下降约88

作者:王伍超;陈金萍;张岫竹;王旭辉;刘大维;周继红

来源:中国神经免疫学和神经病学杂志 2009 年 16卷 4期

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作者:
王伍超;陈金萍;张岫竹;王旭辉;刘大维;周继红
来源:
中国神经免疫学和神经病学杂志 2009 年 16卷 4期
标签:
促肾上腺皮质激素释放激素 促肾上腺皮质激素释放激素受体 蛋白激酶A 巨噬细胞 白细胞介素-6
目的 探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对大鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响及其受体途径.方法 将原代培养的大鼠腹腔巨噬细胞分为对照组、CRH组、CRH受体(CRHR)1选择性阻断剂CP-154526+CRH组(简称CP+CRH组)、CRHR1/2非选择性阻断剂α-helical CRH9-41+CRH组(简称HL+CRH组)以及蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89+CRH组(简称H89+CRH组)5组.对照组仅加入新鲜RPMI l640培养液2 mL培养;CRH处理组加入1×10-9mol/L CRH培养液2 mL;后3组分别加入含CP-154526(5×10-4 mol/L)、α-helical CRH9-41(1×10-6 mol/L)以及H89(1×10-6 mol/L)培养基预孵育2 h,然后加入CRH使培养液CRH终浓度为1×10-9 mol/L.各组分别于CRH刺激后0.5、1、2、4、8 h收集培养皿中上清液,应用ELISA法检测IL-6水平. 结果对照组巨噬细胞分泌IL-6维持在低水平.CRH组巨噬细胞分泌IL-6在2 h时增加,达(7.7±0.741)μg/g prot,高于同一时点的对照组(P<0.05),4 h时达高峰[(16.60±3.94)μg/g prot],接近同时相点对照组的3倍(P<0.01).CP+CRH组巨噬细胞IL-6分泌量在2、4 h时下降非常显著,与同时点CRH组比较分别下降约88