目的 本研究比较了多种可能适用于生食水产鱼肉中诺如病毒(NoV)的提取方法.方法 人工污染GⅡ型NoV三文鱼肉样品,通过病毒洗脱、浓缩、核酸提取,以及实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测等步骤的比较和优化,提高样品中NoV的检测成功率和回收率.结果 采用Tri/Glycine/Beef extract缓冲溶液洗脱、PEG/NaCl溶液沉降、增加氯仿-正丁醇(1∶1,V/V)溶液萃取等步骤,可以有效富集样品中的NoV,并有效去除样品中的PCR抑制成分.优化后的检测方案可以将人工污染GⅡ型NoV的鱼肉样品的回收率由不足3％提高至15.15％,检测灵敏度可以达到17.3 RT-PCRU/25 g.结论 优化后的病毒提取方法具有良好的耐用性和重现性,适合于生食水产鱼肉中NoV的快速检测.
作者：范一灵；杨美成；杨燕
来源：中国食品卫生杂志 2016 年 28卷 6期
