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目的:探讨烧伤血清诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌TNF-a的规律及其在脓毒症中的作用.方法:烧伤血清的剂量效应组分别用含有0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml烧伤血清的培养基与小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7共培养6h,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量,采用流式细胞技术观察细胞的凋亡.烧伤血清的时间效应组以含有2.5ml烧伤血清的培养基,对照组以不含烧伤血清的培养基,另外以含有2.5ml烧伤血清和100mg/L LPS的混合组的培养基分别培养RAW264.7细胞0,2,4,6,8,10,12,24 h,同上留取离心后的培养液上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量.结果:将烧伤血清加入到小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养液中能明显刺激TNF-a的分泌.在0.5 ml~2.5 ml范围内,烧伤血清诱导RAW264.7细胞的TNF-a分泌增加,呈显著的剂量依赖性关系,2.5ml烧伤血清能明显诱导RAW264.7细胞的凋亡;烧伤血清组和烧伤血清与LPS的混合组RAW264.7细胞的TNF-a分泌在0~24 h间呈双相性规律.结论:烧伤血清能诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的TNF-a分泌与凋亡,初步证实烧伤血清在脓毒症的发生、发展中发挥重要作用.

作者:尹朝奇;罗成群;贺全勇;周建大;朱颉;李萍;彭浩;陈铁夫

来源:中国烧伤创疡杂志 2007 年 19卷 2期

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作者:
尹朝奇;罗成群;贺全勇;周建大;朱颉;李萍;彭浩;陈铁夫
来源:
中国烧伤创疡杂志 2007 年 19卷 2期
标签:
烧伤血清 单核巨噬细胞 肿瘤坏死因子 脓毒症
目的:探讨烧伤血清诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌TNF-a的规律及其在脓毒症中的作用.方法:烧伤血清的剂量效应组分别用含有0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml烧伤血清的培养基与小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7共培养6h,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量,采用流式细胞技术观察细胞的凋亡.烧伤血清的时间效应组以含有2.5ml烧伤血清的培养基,对照组以不含烧伤血清的培养基,另外以含有2.5ml烧伤血清和100mg/L LPS的混合组的培养基分别培养RAW264.7细胞0,2,4,6,8,10,12,24 h,同上留取离心后的培养液上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量.结果:将烧伤血清加入到小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养液中能明显刺激TNF-a的分泌.在0.5 ml~2.5 ml范围内,烧伤血清诱导RAW264.7细胞的TNF-a分泌增加,呈显著的剂量依赖性关系,2.5ml烧伤血清能明显诱导RAW264.7细胞的凋亡;烧伤血清组和烧伤血清与LPS的混合组RAW264.7细胞的TNF-a分泌在0~24 h间呈双相性规律.结论:烧伤血清能诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的TNF-a分泌与凋亡,初步证实烧伤血清在脓毒症的发生、发展中发挥重要作用.