研究了hdHGF基因在毕赤酵母中的表达.以人胎盘mRNA为模板,经逆转录、重叠PCR获得hdHGF全长和成熟基因片段.将该基因片段克隆到pPIC9载体上,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,筛选mut+表型,经甲醇诱导可实现rhdHGF的分泌表达.经摇瓶培养筛选出4株表达水平较高的酵母工程菌株,SDS-PAGE分析和Western印迹试验表明,产物分子量约为80 kD,5L发酵罐高密度培养已使生物量达135 g/L(干重),发酵液上清总蛋白量为8.0 g/L,电泳结果表明rhdHGF表达水平为总蛋白的12.3
作者：邓兵兵；方宏清；赵洪亮；刘志敏；薛冲
来源：中国生物化学与分子生物学报 2001 年 17卷 5期
