以人的脂肪组织总RNA为模板,参考已报道的脂蛋白脂酶(¨poprotein lipase,LPL)cDNA设计引物,利用RT-PCR方法扩增得到了LPL cDNA,并经序列测定证实其序列是正确的.在冠心病患者LPL基因第5外显子的830位碱基处发现了G→A的转换,该变异导致LPL基因第192位的密码子CGA被CAA取代,使LPL第192位精氨酸改变为谷氨酰胺.在变异碱基附近设计合成两条引物,其中一条包含所要改变的碱基,利用基于PCR的定点突变技术和体外重组的方法获得了G830A变异的LPL cDNA.
作者:苏智广;张思仲;夏庆杰;肖翠英
来源:中国生物化学与分子生物学报 2001 年 17卷 6期