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利用DNA重组技术,将编码人钠/羧酸协同转运蛋白1(hNaDC1)抗原表位区(W138-Q219)的cDNA克隆至融合表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-hNaDCL6.在大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,获得谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hNaDC1重组融合蛋白的表达.以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,获得纯化的GST-hNaDC1.以此为免疫原制备的抗hNaDC1抗体可特异性识别人类和大鼠肾组织以及小肠组织中天然的钠/二羧酸协同转运蛋白1.利用该抗体,首次证实了hNaDC1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘,与大鼠钠/二羧酸协同转运蛋白1(SDCT1)分布一致.

作者:何娅妮;陈香美;于志恒;吕杨;师锁柱;朱晗玉;彭丽霞

来源:中国生物化学与分子生物学报 2002 年 18卷 3期

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何娅妮;陈香美;于志恒;吕杨;师锁柱;朱晗玉;彭丽霞
来源:
中国生物化学与分子生物学报 2002 年 18卷 3期
标签:
人钠/二羧酸协同转运蛋白1 融合表达 抗体制备
利用DNA重组技术,将编码人钠/羧酸协同转运蛋白1(hNaDC1)抗原表位区(W138-Q219)的cDNA克隆至融合表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-hNaDCL6.在大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,获得谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hNaDC1重组融合蛋白的表达.以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,获得纯化的GST-hNaDC1.以此为免疫原制备的抗hNaDC1抗体可特异性识别人类和大鼠肾组织以及小肠组织中天然的钠/二羧酸协同转运蛋白1.利用该抗体,首次证实了hNaDC1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘,与大鼠钠/二羧酸协同转运蛋白1(SDCT1)分布一致.