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腺病毒载体广泛应用于基因治疗和转基因研究,目前常用的E1/E3缺失型复制缺陷腺病毒载体虽然失去了病毒复制必需的E1基因,但载体上的其它病毒基因仍能在宿主细胞内表达.为研究这些基因对细胞的毒性作用,选择了3种携带没有明显细胞毒性外源基因的腺病毒载体,观察感染2种肿瘤细胞后细胞核形态改变,并用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况.发现大剂量重组缺陷型腺病毒感染细胞后引起细胞变圆,核增大,细胞周期阻滞于G2/M期,继而染色质凝聚,细胞发生坏死或凋亡;各种腺病毒载体造成G2/M阻滞所需感染量不同,但都随时间延长和感染量增加而加重.这些结果提示腺病毒基因对细胞的影响是多方面的,在以此类病毒载体进行基因转移和基因治疗的研究中,精确滴定病毒滴度和转导效率非常重要,腺病毒基因表达造成的毒副作用给此类研究增加了变数.

作者:何湘君;张旗;梁蓉;王申五

来源:中国生物化学与分子生物学报 2003 年 19卷 6期

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作者:
何湘君;张旗;梁蓉;王申五
来源:
中国生物化学与分子生物学报 2003 年 19卷 6期
标签:
腺病毒载体 细胞周期 G2/M阻滞
腺病毒载体广泛应用于基因治疗和转基因研究,目前常用的E1/E3缺失型复制缺陷腺病毒载体虽然失去了病毒复制必需的E1基因,但载体上的其它病毒基因仍能在宿主细胞内表达.为研究这些基因对细胞的毒性作用,选择了3种携带没有明显细胞毒性外源基因的腺病毒载体,观察感染2种肿瘤细胞后细胞核形态改变,并用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况.发现大剂量重组缺陷型腺病毒感染细胞后引起细胞变圆,核增大,细胞周期阻滞于G2/M期,继而染色质凝聚,细胞发生坏死或凋亡;各种腺病毒载体造成G2/M阻滞所需感染量不同,但都随时间延长和感染量增加而加重.这些结果提示腺病毒基因对细胞的影响是多方面的,在以此类病毒载体进行基因转移和基因治疗的研究中,精确滴定病毒滴度和转导效率非常重要,腺病毒基因表达造成的毒副作用给此类研究增加了变数.