人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50 kD的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来胰RNase侵袭.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N端、C端在空间上较为接近.用PCR方法在HRI cDNA 5′端去除30个核苷酸,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.实验结果表明,N端缺失突变的HRI与RNase A的亲合力较野生型HRI降低1倍,但依然具有竞争性抑制RNase A的活性,表明HRI N端10个氨基酸残基缺失后并未丧失其抑制活性.
作者：吴毓；赵宝昌；王继红；任风；吴妍宁；赵鹏；崔秀云
来源：中国生物化学与分子生物学报 2004 年 20卷 6期
