为开发一种新的有临床应用价值的抗血栓药物,根据水蛭素保持抗凝活性的20肽片段,设计并构建了水蛭素相关肽(Hi-lys)与天冬酰胺酶C端的融合表达系统.为方便目的肽与融合伙伴的分离,增加了富含带电序列的8肽(KRKRKKSR)及酸敏感的天冬氨酰-脯氨酸(Asp-Pro)位点,获得了表达质粒pED-P8-Hi-lys.将其转化E.coli BL-21,玉米浆培养基(kanr)培养,乳糖诱导获得融合蛋白(AnsB-C-P8-Hi-lys)的高效表达.通过细菌裂解、包涵体洗涤、尿素溶解、乙醇沉淀、酸水解和DEAE-纤维素52柱层析纯化获得目的肽Hi-lys,用凝血酶测定法测得其抗凝活性为50 ATU/mg.
作者：吴洁；胡卓逸；刘景晶
来源：中国生物化学与分子生物学报 2005 年 21卷 3期
