人热休克转录因子1(heat shock transcription factor l,HSF1)的结构和功能与其半胱氨酸残基的氧化还原化学性能相关.为了鉴别在氧化还原状态改变时参与分子内双硫键交联的HSF1半胱氨酸残基,了解其氧化还原化学性改变在生物学调节中的重要性,通过建立和应用重组人HSF1中的5个半胱氨酸突变体和1个双重突变体,并用已知的巯基氧化介导剂联氨(diamide,H2N·NH2)和还原介导剂二硫苏糖醇(DTT)与在体外转录和翻译的HSF1突变体蛋白质预孵育,观察其构象和与DNA结合活性的改变.结果显示,与野生型一样,所有的HSF1半胱氨酸突变体都能被热激活并与DNA结合;联氨预处理能阻断这种作用,但对突变体C153S和双重突变体G373、378S无效.氧化还原状态对HSF1构象改变显示联氨能使HSF1野生型和突变体C36T和C103Y形成氧化型HSF1(ox-HSF1)构象,但对C153S和C373、378S双重突变体不起作用,而单一突变体C373S或C378S在联氨作用下分别形成二种分子量稍不同的ox-HSF1构象.结果提示,在氧化条件下HSF1中的半胱氨酸残基C153可能与C373或与G378形成分子内二硫键交联;在对抗氧化作用上5C153和C373、C378起着"关闭性"作用,预防了HSF1的激活.
作者：林正；黄帆；罗兰；张式鸿；马中富；吴兴刚；徐康
来源：中国生物化学与分子生物学报 2005 年 21卷 3期
