在大肠杆菌中表达和纯化恶性疟原虫随机重组多表位蛋白疫苗M.RCAg-1,将目的蛋白纯度最高化,回收率最大化.从工程菌BL21( DE3)-M.RCAg-1/pDS-eX提取重组质粒进行测序验证,用IPTG诱导表达,分别采用Ni亲和纯化,阴离子交换层析和凝胶过滤层析等不同组合方式的5种纯化方案进行纯化,根据最终纯度和回收率选择最佳纯化方案.Ni-NTA Agarose特异性好,一步纯化后M.RCAg-1纯度可达79.98％,后续的两步阴离子交换和分子筛纯化能显著提高M.RCAg-1的纯度,最终纯度可超过99％,回收率大于15％.试验确立了恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-I在大肠杆菌中的表达和纯化方案,为下游放大生产和进一步研究M.RCAg-1的效果奠定了基础.
作者：何学虎；蔺亚晖；王恒
来源：中国生物医学工程学报 2012 年 31卷 2期
