目的对乙脑减毒活疫苗SA14-14-2株生产毒种及其疫苗病毒滴度、脑内毒力和E区核苷酸序列进行回顾性测定.方法应用乳金黄地鼠肾传代细胞(BHK-21)结晶紫蚀斑法进行病毒滴度的测定,小鼠脑内法检测疫苗脑内毒力.应用RT-PCR方法扩增SA14-14-2生产毒种和疫苗E区的核苷酸,经凝胶层析纯化的PCR产物直接用于测序或克隆到pGEM-T载体中,经酶切和PCR鉴定后进行测序.结果疫苗在-20°C保存长达10多年,疫苗病毒滴度下降不超过0.5 lg;脑内毒力未见毒力回升.病毒蚀斑形态仍保持较SA14野毒株形态小的特性;以不同批次疫苗和生产毒种提取的病毒RNA作为模板进行RT-PCR扩增,扩增的基因片段与预期大小一致;E区基因序列与野毒株差异的8个氨基酸没有一个发生回复突变.结论 SA14-14-2生产毒种及其不同年度不同批次疫苗的生物表型和E区核苷酸的特性是十分稳定的.
作者：贾丽丽；俞永新；黄莺；王志伟；岳广智；郑铮；董关木
来源：中国生物制品学杂志 2004 年 17卷 1期
