目的利用DNA改组技术大幅度提高抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的生物活性.方法采用RQ1 DNase Ⅰ不完全酶解ST-Ⅲ基因,产生长度为50～100 bp的随机片段,用低熔点胶回收.无引物PCR从小片段组装成大片段,通过有引物PCR得到正确大小的片段.线性化的质粒通过电转转入毕赤酵母GS115细胞.结果获得了5株高活性的克隆.结论探索了在毕赤酶母进行DNA改组和筛选的方法和路线,成功进行了AT-Ⅲ的改组,并为其它分子的改组提供借鉴.
作者：于群；宋丽雅；贺敏；卜凤荣；孙文种；窦桂芳；章金刚
来源：中国生物制品学杂志 2005 年 18卷 1期
