目的 以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗.方法 将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达.Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Western blot鉴定.用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性.结果 所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H11gV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清.经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞.结论 rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用.
作者：王伟华；张英起；颜真
来源：中国生物制品学杂志 2007 年 20卷 1期
