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目的 建立具有焦谷氨酸封闭N-端的重组抗体N-端氨基酸序列分析方法.方法 利用高温稳定的焦谷氨酸肽酶,在重组人源抗狂犬病病毒单抗样品高温变性条件下,去除其N-端焦谷氨酸封闭.经还原SDS-PAGE和电印迹后,进行N-端氨基酸序列测定,并与电印迹后在PVDF膜上去封闭处理效果进行比较.结果 用该方法去封闭后的抗体样品N-端焦谷氨酸去除效果较好,可顺利进行N-端氨基酸序列测定;而电印迹后在PVDF膜上二去封闭处理,N-端焦谷氨酸不能充分去除,无法进行N-端氨基酸序列测定.结论 该方法适于具有焦谷氨酸封闭N-端的单抗的N-端氨基酸序列分析.

作者:魏敬双;程立均;贾茜

来源:中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 12期

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作者:
魏敬双;程立均;贾茜
来源:
中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 12期
标签:
重组单克隆抗体 焦谷氨酸封闭 N-端氨基酸 序列测定
目的 建立具有焦谷氨酸封闭N-端的重组抗体N-端氨基酸序列分析方法.方法 利用高温稳定的焦谷氨酸肽酶,在重组人源抗狂犬病病毒单抗样品高温变性条件下,去除其N-端焦谷氨酸封闭.经还原SDS-PAGE和电印迹后,进行N-端氨基酸序列测定,并与电印迹后在PVDF膜上去封闭处理效果进行比较.结果 用该方法去封闭后的抗体样品N-端焦谷氨酸去除效果较好,可顺利进行N-端氨基酸序列测定;而电印迹后在PVDF膜上二去封闭处理,N-端焦谷氨酸不能充分去除,无法进行N-端氨基酸序列测定.结论 该方法适于具有焦谷氨酸封闭N-端的单抗的N-端氨基酸序列分析.