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目的 在大肠杆菌中表达PTD-SARA融合蛋白,并对其进行纯化和鉴定.方法 使用大肠杆菌偏爱密码子合成PTD-SARA全长基因,将其克隆人载体pQE-30中,构建重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA,转化感受态大肠杆菌M15,IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定及N-端测序.结果 重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA经双酶切及测序鉴定证明构建正确.1.0 mmol/L IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的25

作者:宋扬;张珍;张英起;黄晨

来源:中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 3期

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作者:
宋扬;张珍;张英起;黄晨
来源:
中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 3期
标签:
PTD-SARA融合蛋白 表达 纯化 慢性肾病 纤维化
目的 在大肠杆菌中表达PTD-SARA融合蛋白,并对其进行纯化和鉴定.方法 使用大肠杆菌偏爱密码子合成PTD-SARA全长基因,将其克隆人载体pQE-30中,构建重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA,转化感受态大肠杆菌M15,IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定及N-端测序.结果 重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA经双酶切及测序鉴定证明构建正确.1.0 mmol/L IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的25