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目的 探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilinl,NRP1)基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响.方法 构建NRP1基因特异性shRNA表达质粒,经脂质体介导转染人人胃腺癌SGC7901细胞.采用Western blot法检测细胞中NRP1蛋白的表达水平,应用流式细胞术和Annexin-V-FITC/PI法检测细胞的增殖水平和凋亡率.结果 经酶切及测序鉴定证明,shRNA-NRP1质粒构建正确,转染SGC7901细胞48 h后,能有效抑制NRP1蛋白的表达,G0/G1期细胞百分比显著升高,S期细胞显著减少,细胞凋亡率增加.结论 shRNA-NRP1质粒能有效抑制胃腺癌SGC7901细胞株NRP1蛋白的表达,细胞周期阻滞在G0/G1期,从而降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期.

作者:连海峰;吴小翎

来源:中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 11期

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作者:
连海峰;吴小翎
来源:
中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 11期
标签:
神经纤毛蛋白质1 胃肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡
目的 探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilinl,NRP1)基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响.方法 构建NRP1基因特异性shRNA表达质粒,经脂质体介导转染人人胃腺癌SGC7901细胞.采用Western blot法检测细胞中NRP1蛋白的表达水平,应用流式细胞术和Annexin-V-FITC/PI法检测细胞的增殖水平和凋亡率.结果 经酶切及测序鉴定证明,shRNA-NRP1质粒构建正确,转染SGC7901细胞48 h后,能有效抑制NRP1蛋白的表达,G0/G1期细胞百分比显著升高,S期细胞显著减少,细胞凋亡率增加.结论 shRNA-NRP1质粒能有效抑制胃腺癌SGC7901细胞株NRP1蛋白的表达,细胞周期阻滞在G0/G1期,从而降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期.