目的 构建以霍乱毒素B亚单位(Cholera'toxin B subunit,CT8)为分子佐剂的Asia 1型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)复合多表位亚单位疫苗,在毕赤酵母中进行表达,并评价其免疫原性.方法 构建毕赤酵母表达质粒pPIC9K-P1/2A-CTB-Tepi,转化至毕赤酵母GS115中,甲醇诱导表达,表达产物经硫酸铵沉淀法纯化后,进行SDS-PAGE和Westem blot分析.将纯化的P1/2A-CTB-Tepi蛋白和FMD灭活疫苗分别免疫BALB/c小鼠,以注射PBS作为对照,分别于0、21 d各免疫1次.每周尾静脉采血.分离血清,ELISA法检测血清抗体水平;第2次免疫后10 d.处死小鼠,分离脾脏淋巴细胞,进行淋巴细胞增殖试验和IFNγ/ELISPOT检测.结果 目的蛋白在毕赤酵母中经诱导表达后可分泌到培养上清中,在相对分子质量约为82 600(P1/2A)和40 500(CTB-Tepi)处可见2条特异性蛋白表达条带,占上清液中可溶蛋白的21
作者：胡博；鲁会军；李霄；叶明；朱战波；杜寿文；袭莹；王婧；韩佳丽；李洋；金扩世；田明尧；李昌；金宁一
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 11期
