目的 表达、纯化梅毒螺旋体特异性外膜蛋白TP17和TP0453,并以其作为包被抗原,建立新型梅毒酶联免疫诊断方法.方法 PCR扩增TP17和TP0453基因,分别克隆入pET-22b(+)和pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET-22b(+)-TP17和pET-28a(+)-TP0453,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物纯化后进行Western blot鉴定.以纯化的重组TP17和TP0453蛋白作为诊断抗原,建立间接ELISA方法,并对该方法进行验证.结果 PCR分别扩增出500和800 bp的TP17和TP0453基因片段,测序结果与GenBank中登录的CDS序列完全一致.重组表达质粒pET-22b(+)-TP17和pET-28a(+)-TP0453经双酶切鉴定正确;重组TP17和TP0453蛋白的相对分子质量分别约为18 000和29 000.表达量分别约占菌体总蛋白的18
作者：肖洁；郭刚；张卫军
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 12期
