目的 制备抗人血小板单克隆抗体,并应用于临床血小板抗体的筛检及血小板交叉配型.方法 以人O型血小板为免疫原,免疫BALB/c小鼠,将NS-1细胞与免疫小鼠脾细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,有限稀释法克隆,并对阳性杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体进行鉴定;采用亲和层析法纯化单抗,用该单抗建立周相凝集法,检测临床患者血清样本,并与德国欧蒙公司的同类试剂盒(MASPAT)检测结果进行比较.结果 获得1株抗人血小板杂交瘤细胞株1C1,其分泌的单抗性能稳定,可特异性针对人血小板糖蛋白Ib/IX,细胞稳定传代8个月以上,培养上清效价大于为1:106,37℃的稳定性可持续35 d,纯化后的抗体效价可达1:108.建立的固相凝集法对50例临床血清样本的检测结果与同类试剂盒(MASPAT)一致.结论 已制备了抗人血小板单克隆抗体,为其进一步临床应用奠定了基础.
作者:牟忠梅;段生宝;刘颖;李春明;陈喜朋;李勇
来源:中国生物制品学杂志 2011 年 24卷 6期