目的 建立检测重组痘苗病毒(Recombinant Tiantan vaccinia,rTV)艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法.方法 rTV艾滋病疫苗经皮内注射BALB/c小鼠,免疫后1～6周,采集小鼠脾细胞,ELISPOT法检测小鼠细胞免疫水平,确定最佳检测时间,并对免疫剂量、肽库刺激浓度进行优化.应用ELISPOT方法对3批rTV疫苗成品进行检测,验证该方法的适用性；按现行检定标准对同批疫苗进行重复检测,验证该方法的重复性；应用ELISPOT和ICS方法同时对rTV疫苗进行检测,验证该方法与ICS法的相关性.结果 rTV艾滋病疫苗最佳免疫剂量为50μl/只,免疫后4周,混合多肽库刺激终浓度为4μg/ml,淋巴细胞分泌IFNγ的水平较高；ELISPOT法适用性和重复性较好,且与ICS法具有较好的相关性(r=0.767,P＜0.05).结论 已成功建立了检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法.
作者：李媛媛；凌媛；马志新；徐静
来源：中国生物制品学杂志 2011 年 24卷 12期
