目的 探讨狂犬病病毒( Rabies virus,RV )aG株在原代鸡胚成纤维细胞上的传代适应性.方法 将RV北京株固定毒10aG株豚鼠脑毒种在鸡胚成纤维细胞上连续传代培养,显微镜观察细胞的形态变化,ELISA检测各代次收获液中的病毒量,取11、21、31代病毒收获液,小鼠脑内毒力测定法检测病毒滴度.利用正交试验筛选最适病毒培养条件,以筛选的最佳比例接种病毒,绘制病毒生长曲线,并进行特异性及免疫原性检测.结果 狂犬病病毒aG株感染鸡胚成纤维细胞未观察到明显的细胞病变效应,随着传代次数的增加,病毒含量呈上升趋势,11、21、31代病毒收获液的滴度分别为4.0、7.7和7.17 LogLD50/ml;多次传代后,最适培养条件为细胞浓度150×104个/ml、接种比例1∶500、血清浓度2%、收获时间为5 d;病毒连续收获3次后,细胞开始脱落,经检测其病毒滴度可达7.0 logLD50/ml以上,中和指数可达8 500,第21代病毒制备成的试制疫苗效价为2.0 IU/ml.结论 RV北京株固定毒10 aG株豚鼠脑毒种可适应于鸡胚细胞培养,为鸡胚细胞狂犬病疫苗的研究奠定了基础.
作者:王远征;卫江波;张国强;王伟伟;马昱;史雨舟
来源:中国生物制品学杂志 2012 年 25卷 6期