目的 用现有方法及新方法分别制备水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)(Oka株)毒种,比较两种方法制备的毒种对2BS细胞的感染复数及增殖动态差异.方法 用现有方法(用含2％小牛血清的病毒维持液于-70℃条件下冻存Oka株毒种)和新方法(用含90％小牛血清的病毒冻存液于-196℃条件下冻存Oka株毒种)制备第47代Oka株VZV毒种,采用不同的MOI(0.000 5、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1)感染第37代2BS细胞,观察细胞病变(CPE)情况,收获不同MOI接种和培养不同时间点病毒制备疫苗,采用噬斑法检测疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性,确定两种方法制备的毒种对2BS细胞感染的最适MOI.结果 现有方法制备毒种以0.01 ～0.1 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期;新方法制备毒种以0.001 ～0.01 MOI感染2BS细胞72 h后,病变达到高峰期.两种方法收获的病毒液制备的成品疫苗的病毒滴度为4.4 ～4.6 lgPFU/ml,37℃放置1周,病毒滴度3.8～4.0 lgPFU/ml;疫苗原液、成品滴度以及37℃稳定性无差异,均达到本公司水痘减毒活疫苗制造与检定规程制定的相关标准.结论 现有方法和新方法制备的毒种最适MOI分别为0.01～0.1和0.001～0.01,新方法制备的毒种更适合水痘疫苗的生产.
作者：梁慧颖；隋波；赫宝双；梁雪；李生军；张宇；杨晓叶；沈红杰
来源：中国生物制品学杂志 2014 年 27卷 11期
