目的 对重组2型腺相关病毒肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(recombinant adeno-associated virus 2 encoding tumor necrosis factor-related apoptosis-induced ligand,rAAV2-TRAIL)基因治疗制剂进行质量分析,并针对其关键质量属性建立质控方法.方法 采用PCR法对rAAV2-TRAIL基因治疗制剂中插入的启动子CAG和目的基因TRAIL进行鉴别;在腺病毒(Ad5)的辅助下,将rAAV2-TRAIL体外感染293T细胞后,采用ELISA法检测培养上清中目的蛋白TRAIL的表达量,检测rAAV2-TRAIL对神经胶质瘤U251细胞的体外杀伤活性;设计引物及探针,采用Q-PCR法检测rAAV2-TRAIL基因治疗制剂中的rAAV2-TRAIL滴度、可能存在的复制型rcAAV滴度以及残余辅助病毒1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSVl)滴度.结果 启动子CAG和目的基因TRAIL的PCR鉴定结果与理论及理化对照品相符;rAAV2-TRAIL感染293T细胞48 h后,上清中TRAIL表达量为(0.36±0.18) ng/ml,RSD为50.0％;rAAV2-TRAIL体外作用于神经胶质瘤细胞U251,细胞生长相对抑制率为(26.6±3.75)％,RSD为14.1％;制剂中rAAV2-TRAIL滴度为(4.72×1011±0.52×1011) copies/m1,RSD为11.0％,rcAAV滴度为(2.49×107±0.18×107) copies/ml,RSD为7.2％,HSV1滴度为(6.02×106±0.51×106) copies/ml,RSD为

作者：付志浩；高凯；李永红；李响；陶磊；王兰；丁有学；郭莹；饶春明

来源：中国生物制品学杂志 2015 年 28卷 5期