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目的 建立检测Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 2,HSV-2)DNA拷贝的real-time qPCR方法.方法 设计靶向HSV-2 gD片段的特异性引物和探针,以HSV-2基因组为模板,建立检测HSV-2 DNA拷贝的real-time qPCR方法,并进行重复性和灵敏度验证.结果 HSV-2 DNA拷贝在1×107~1×102 eopies/ml范围内,线性良好,r2>99%,灵敏度为l×102 copies/ml;不同稀释度参考品检测结果的批间变异系数为1.70%~ 5.35%,批内变异系数为1.70%~4.8%.结论 与常规的以质粒为模板的real-time qPCR方法相比,以HSV-2基因组为模板建立的real-time qPCR方法的灵敏度更高,可用于生殖器疱疹临床诊断的优化.

作者:杜丽芳;张晓焕;高华;苏文浩;梁普兆;任秀秀;赵婷婷;卫江波;沈心亮

来源:中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 10期

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作者:
杜丽芳;张晓焕;高华;苏文浩;梁普兆;任秀秀;赵婷婷;卫江波;沈心亮
来源:
中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 10期
标签:
Ⅱ型单纯疱疹病毒 实时定量聚合酶链式反应 脱氧核糖核苷酸 拷贝 Herpes simplex virus 2 (HSV-2) Real-time qPCR Deoxyribonucleotide Copy
目的 建立检测Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 2,HSV-2)DNA拷贝的real-time qPCR方法.方法 设计靶向HSV-2 gD片段的特异性引物和探针,以HSV-2基因组为模板,建立检测HSV-2 DNA拷贝的real-time qPCR方法,并进行重复性和灵敏度验证.结果 HSV-2 DNA拷贝在1×107~1×102 eopies/ml范围内,线性良好,r2>99%,灵敏度为l×102 copies/ml;不同稀释度参考品检测结果的批间变异系数为1.70%~ 5.35%,批内变异系数为1.70%~4.8%.结论 与常规的以质粒为模板的real-time qPCR方法相比,以HSV-2基因组为模板建立的real-time qPCR方法的灵敏度更高,可用于生殖器疱疹临床诊断的优化.