目的 响应面法优化检测己二酸二肼(adipate hydrazine,ADH)衍化后破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)纯度的排阻型高效液相(SEC-HPLC)法.方法 SEC-HPLC层析柱Superdex 200 increase 3.2/300流动相为:20 mmol/LNa2CO3/NaHCO3,150 mmol/L NaCl,pH9.0,柱温25℃,单针检测时间60 min.采用响应面法及中心复合表面设计模型(Central Composite Face-centred,CCF)对层析柱的流速、进样量、样品浓度进行优化,通过分离度、峰对称性、峰理论塔板数、单针进样时间等评价指标,确定最优色谱参数,并在最优色谱参数下连续进样100针,验证其分离效果.结果 色谱柱的最优色谱条件为:流速50μl/min,进样量5μl,样品浓度1.Omg/ml,连续进样100针各响应量均满足优化目标.结论 成功采用响应面法优化了检测ADH衍化后TT纯度的SEC-HPLC法,且优化后的方法具有良好的稳定性.
作者：蔡峰；马诚；蓝天；陈思；周觉非；赵祥宇；杨溢尧；崔长法
来源：中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 10期
