目的 建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺.方法 分别采用VP-SFM和含5％牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细胞间及无血清与含血清培养基培养Vero细胞间制备的狂犬病病毒滴度及效力.将2 g/L微载体cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero细胞,37℃培养3d,按MOI=0.02接种狂犬病病毒CTN-1V株,检测病毒收获液的病毒滴度及效力,每天显微镜下观察细胞生长情况,计算细胞比生长速率.结果 无血清培养基培养不同代次Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度和效力差异无统计学意义(P＞0.05);无血清和含血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度差异无统计学意义(P＞0.05),但无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒效力明显高于含血清的培养基(P＜0.05).搅拌瓶微载体系统培养Vero细胞制备狂犬病病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,收获病毒液的平均病毒滴度为6.50 lgFFU/ml,平均病毒效力为6.77 IU/ml.结论 初步建立了微载体系统无血清培养Vero细胞制备狂犬病病毒的工艺,为无血清规模化制备狂犬病疫苗奠定了基础.
作者：孙燕；张香玲；陈军；刘鹏；马超；张生琰；李薇
来源：中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 10期
