目的 构建细丝蛋白A(filaminA,FLNa)shRNA慢病毒载体,并检测其在肝癌细胞HepG2和Huh7中的干扰效率.方法 通过合成干扰基因片段,插入至shRNA慢病毒载体GV298中,构建FLNa shRNA慢病毒载体shRNA-Filamin1和shRNA-Filamin2,转染HepG2和Huh7细胞,荧光显微镜下观察红色荧光表达,Western blot法检测Filamin A干扰效率.结果 构建的FLNashRNA慢病毒载体经测序证明构建正确;转染24 h后,HepG2和Huh7细胞可见红色荧光;转染48 h后,shRNA-Filamin1和shRNA-Filamin2的干扰效率在HepG2细胞中分别约为45.4％和63.7％,在Huh7细胞中分别约为76.5％和78.3％.结论 成功构建FLNa shRNA慢病毒载体,在HepG2和Huh7细胞中干扰效率较高;可与多种病毒的受体蛋白相互作用,从而参与病毒的复制周期,为今后病毒复制及其致病机理的研究提供了新的思路.
作者：黄文宇；龙飞燕；杨臣臣；朱映柔；黄芬；初佳芮
来源：中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 11期
