目的 构建柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)cDNA感染性克隆.方法 提取CA16基因组RNA,经RT-PCR得到基因组全长cDNA,插入至TOPO-XL-PCR载体,获得CA16全长cDNA克隆.采用T7聚合酶系统将线性基因组cDNA体外转录出病毒基因组RNA,纯化后转染Vero细胞,获得拯救病毒.通过RT-PCR、基因测序及免疫荧光法对拯救病毒进行鉴定,并对拯救病毒与母本病毒的增殖特性进行比较.结果 病毒基因组RNA转染Vero细胞后48 h,可见典型的肠道病毒致细胞病变.拯救病毒经RT-PCR、基因测序和免疫荧光鉴定为CA16,且与母本野生型病毒增殖特性基本一致.结论 成功构建了具有感染性的CA16全长cDNA克隆,为研究CA16基因功能和研发CA16新型疫苗奠定了基础.
作者：李嘉祺；李洪哲；郑惠文；宁若彤；范海涛；杨泽宁；胡雅洁；刘龙丁
来源：中国生物制品学杂志 2018 年 31卷 1期
