目的 建立重组人源化抗CD52单克隆抗体相对抗原结合活性的检测方法,并进行验证.方法 测定3种人淋巴瘤细胞(MC/CAR、HUT78、RAMOS)CD52抗原的表达率,选择CD52表达率最高的作为靶细胞.以系列稀释的重组人源化抗CD52单克隆抗体的参比品和供试品作用表达CD52抗原的人淋巴瘤细胞,FITC标记的兔抗人IgG结合人淋巴瘤细胞上的重组人源化抗CD52单克隆抗体,流式细胞分析仪测定几何荧光均数.通过四参数方程拟合,计算参比品和供试品的半数有效浓度(EC50)及相对结合活性.并对该方法的专属性、准确性、精密性、线性范围和耐用性进行验证.结果 淋巴瘤MC/CAR细胞CD52抗原表达率最高,确定该细胞为靶细胞.CD52抗原与无关抗体不存在特异性结合;重复3次测定不同理论相对结合活性人源化抗CD52单克隆抗体参比品的回收率在97.4％～111.9％之间,相对结合活性及回收率的RSD值均在10％以内;同一实验人员于同一天6次重复检测重组人源化抗CD52单克隆抗体相对结合活性在86.93％ ～ 114.42％之间,RSD值在10％以内,3d内不同实验员分别检测5个效价样品的相对结合活性的RSD在20％以内;在重组人源化抗CD52单克隆抗体理论效价50％～150％范围内,与相对结合活性呈良好的线性,线性回归方程为y=1.0452x-1.082,R2为0.992 1;MC/CAR细胞在第28代时仍
作者：秦海艳；熊颖；黄峥；乔玉玲；陈继军；安晨；庄超；毛晓燕
来源：中国生物制品学杂志 2018 年 31卷 1期
