目的 建立利用毛细管电泳法测定重组人源化免疫球蛋白G (immunoglobulin G,IgG)纯度的方法,并进行优化和验证.方法 采用单因素法,对稀释液、碘乙酰胺浓度(非还原条件)、加热方式、进样电压、进样时间、分离电压、样品盘和卡盒温度进行多水平优化,并利用优化的方法测定IgG2的纯度.以峰面积对样品加样量进行线性回归,确定该方法的线性范围,并对该方法进行精密度、准确度及溶液稳定性验证.结果 最佳电泳条件为:选用超纯水作为稀释液,250 mmol/L碘乙酰胺(非还原条件),70℃干热10 min,进样电压为5 kV,进样时间为30 s,分离电压为15 kV,样品盘和卡盒温度为20℃.在优化的色谱条件下,在还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50～ 150 μg,相关系数为0.998,重复性的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.14％,中间精密度的RSD为0.24％,且20 ℃放置13h稳定;在非还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50～150 μg,相关系数为0.999,重复性的RSD为0.36％,中间精密度的RSD为0.16％,且20℃放置13h稳定.结论 该方法线性关系良好,且精密度、准确度、灵敏度较高,测定结果稳定可靠,适用于重组人源化IgG2的纯度分析.
作者：黄碧君；黄艳；胡红琴；郭占云
来源：中国生物制品学杂志 2018 年 31卷 3期
