目的 建立人类乳头瘤病毒(human papillomaviruses,HPV)特异性抗体单一稀释度ELISA检测法,并进行方法验证及初步应用.方法 以HPV16及HPV18 L1病毒样颗粒蛋白作为包被抗原,血清样品采用单一稀释度稀释(未免疫血清及免疫后血清分别进行100及500倍稀释),建立HPV特异性抗体的单一稀释度ELISA检测法,并验证方法的特异性、准确性、线性范围、检测限度及精密性.采用建立的方法检测自然感染HPV及接种疫苗后的血清样本(各28份),并与假病毒中和试验(pseudovirus-based neutralization assay,PBNA)检测结果进行比较.结果 100份阴性血清样本HPV16及HPV 18 IgG抗体均为阴性;HPV16及HPV18抗体滴度的平均回收率分别为74％和73％;HPV16及HPV18抗体的定量检测范围分别为0.049～0.370 IU/mL及0.030～0.231 IU/mL;该方法重复性CV在2.9％～6.6％之间,日间精密性CV在7.7％～ 11.9％之间.接种疫苗后的血清样本检测值显著高于自然感染样本(P＜0.05),接种疫苗后的血清样本检测值与PBNA法检测结果具有显著相关性(HPV16和HPV18抗体检测结果的r值分别为0.727和0.800).结论 成功建立了HPV特异性抗体的单一稀释度ELISA检测法,且具有较好的特异性、准确性、精密性,可用于HPV疫苗免疫效果评价及疫苗上市后抗体水平的监测.

作者：赵慧；潘晖榕；李娟；林之杰；林碧珍；李长贵

来源：中国生物制品学杂志 2019 年 32卷 9期