目的 建立狂犬病病毒滴度的直接免疫荧光检测法,并进行验证.方法 将狂犬病病毒Pitman-Moore株(PM株)病毒液进行5倍系列稀释后,感染MRC-5细胞,37℃培养24 ～ 30 h;用FITC标记的抗狂犬病病毒特异性抗体进行染色,通过计数病毒感染细胞的荧光灶数计算病毒滴度,并验证方法的重复性、中间精密度及线性范围.采用小鼠脑内滴定法及建立的直接免疫荧光法同时检测20批PM株病毒液,并分析两者间的相关性.结果 重复性及中间精密度验证结果的变异系数(CV)均＜2％;病毒稀释倍数在50～ 5-7范围内,与病毒滴度呈良好的线性关系,线性回归方程为y=-0.7392 X+8.031,R2=0.9866.两种方法检测结果趋势相同(R-Square=0.905),呈良好的正相关性.结论 本实验建立了狂犬病病毒滴度的直接免疫荧光检测法,且具有良好的重复性及中间精密度,可应用于狂犬病疫苗生产过程中的质量控制.
作者：刘宏伟；田玉玲；朱琨莹；张岩；杨帆；刘银星；石亮；闫昆明
来源：中国生物制品学杂志 2021 年 34卷 6期
