目的 建立血清过氧化氢酶(catalase,CAT)活度臧红T(safranine T,ST)荧光猝灭检测方法,并进行优化.方法 建立的方法分为酶促反应和荧光猝灭反应2个阶段,对荧光猝灭反应的催化剂(Fe3+和 Fe2+)及其用量(0.00～1.20 mL)、ST用量(0～6 mL)、硫酸用量(0～6 mL)、荧光猝灭时间(2.5～60.0 min)及酶促反应的H202用量(0.00～3.00 mL)、酶促反应时间(0～30 min)进行优化.同时确定方法的线性范围,进行干扰试验,并验证准确性.结果 最佳检测条件:催化剂为Fe2+,Fe2+用量为0.80 mL,ST用量为3.00 mL,荧光猝灭反应不需加入硫酸(pH范围为4.11～4.82),荧光猝灭时间为15 min;H2O2用量为1.00 mL,酶促反应时间为10 min.CAT活度在5×10-5～0.02 U/mL范围内,与F呈良好的线性关系,线性方程为y=1807x+0.752 7,r=0.998 0;检测限为3.81×10-5 U/mL;检测体系中存在1×10-5 mol/L的Vc、葡萄糖、果糖、乳糖、半乳糖时测定误差＜5％;6份血清加标样品回收率为98.0％～102.0％.结论 建立的CAT活度ST荧光猝灭检测方法具有良好的准确性及较低的检测限,可用于临床人血清中CAT活度的检测.
作者：张爱菊；白莹；薛林科；戴兴德；张小林；董娜
来源：中国生物制品学杂志 2022 年 35卷 8期
