目的 建立针对抗程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)/细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4,CTLA-4)双特异性抗体的关键质量属性质控方法.方法 采用报告基因法测定PD-1靶点的细胞生物学活性,流式细胞荧光分选法测定CTLA-4靶点的竞争结合活性;还原/非还原十二烷基硫酸钠毛细管电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)和分子排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法进行抗体分子大小变异体的控制;成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis,iCIEF)法测定电荷异质性;运用肽图对抗PD-1/CTLA-4双特异性抗体进行鉴别;超高效液相色谱法分析糖型.结果 PD-1靶点的细胞生物学活性半数最大效应浓度(concentration for 50％of maximal effect,EC50)为(6.91±0.78)nmol/L,相对参比品的生物学效价为(103.50±13.08)％,RSD为12.64％;CTLA-4靶点活性的EC50为(0.35±0.28)nmol/L,相对参比品的生物学效价为(99.30±9.15)％,RSD为8.32％;还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为(98.86±0.02)％.非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(93.0

作者：俞小娟；于传飞；刘春雨；武刚；李萌；王文波；郭璐韵；付志浩；赵雪羽；王兰

来源：中国生物制品学杂志 2023 年 36卷 10期