目的 建立来源于外周血的树突状细胞(DCs)的纯化培养方法 并观察DCs的形态及功能.方法 以Ficoll密度梯度离心法从正常入外周血中分离出外周血单个核细胞(PBMNC)后,用体外培养的手段,采用培养黏附法或经免疫磁珠筛选法,获得单核细胞;分别加入不同浓度的细胞因子(重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子重组人白介素4重组人肿瘤坏死因子α)诱导培养,培养12 d诱导出DCs;用光镜和电镜观察培养的DCs,用流式细胞仪检测DCs表面的细胞表型(CD80、CD83、CD86、CD1α、HLA-DR),MTT法检测DC对T细胞的刺激增殖效应.结果 在体外诱导出外周血来源的成熟DCs,电镜和光镜分析表明具有DCs的典型形态,所培养的细胞表面高表达CD80、CD83、CD86、CD1α,、HLA-DR,并具有刺激异基因淋巴细胞增殖的能力.结论 应用外周血来源的单个核细胞,采用培养黏附法或免疫磁珠分选法分选出的单核细胞,细胞因子培养12 d可得到成熟正常的DCs.
作者:李素萍;刘忠;杨宏友;吕蓉;方勤;李敏;赵刚;王震
来源:中国输血杂志 2008 年 21卷 10期