目的 构建靶向RNA干扰T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4(TIM4)基因的慢病毒重组表达载体,分析TIM4基因对T细胞的影响.方法 根据Gene Bank报道的TIM4 mRNA序列(NM_178759.4)设计干扰片段,通过基因工程方法构建靶向RNA干扰TIM4基因的慢病毒载体,体外转染DCs后与T淋巴细胞共培养,检测细胞增殖情况及细胞因子分泌水平.结果 成功构建基因干扰的慢病毒载体并转染DCs.MTT实验表明TIM4-DC组T细胞的增殖受到抑制;ELISA检测显示:TIM4-DC组IL-12和IFN-γ的分泌均明显高于对照组(P<0.05).结论 RNA干扰TIM4基因在DCs表达后,可抑制T细胞增殖的作用以及T细胞向Th2细胞分化.
作者:张琦;张艳霞;方勇;杨李辉;夏荣
来源:中国输血杂志 2013 年 26卷 9期