目的 验证ssDNA适配体阻断RhD抗原-抗体的结合,进而阻断FcγR介导巨噬细胞吞噬作用的能力.方法 0.2%红细胞悬液分为三组:实验组(加入经ssDNA处理过的RhD IgG单克隆抗体)、空白对照(未处理的红细胞悬液)、阳性对照(加入未经ssDNA处理的RhD IgG单克隆抗体).37℃孵育30 min.洗涤后加入1∶500的羊抗人IgG Alexa Fluor 488荧光抗体,37℃,30 min.洗涤后流式细胞仪检测.单核细胞单层试验收集6人份外周血单核细胞于37℃混合培养1h,洗去未贴壁细胞.以2∶1体积加入不含荧光抗体的三组红细胞,培养1.5h后进行瑞氏-姬姆萨染色.镜下观察500个单核细胞,计算平均吞噬指数.结果 流式结果显示,阳性对照荧光强度为3 166.33±172.55,而实验组荧光强度仅为307.00±45.18,与空白对照组(287.33± 30.50)无显著性差异.MMA实验结果显示,阳性对照组单核细胞平均吞噬指数(7.20± 1.48)》Cut-off值(0.35),结果为阳性;试验组的吞噬指数(0.07±0.12)低于Cut-off值,结果为阴性.结论 ssDNA与RhD抗体结合后可使RhD抗体丧失与RhD抗原特异性结合的能力,以至于红细胞不会被致敏,为新生儿溶血病的治疗提供了新的思路.
作者:李桢;徐华;周华友;张印则
来源:中国输血杂志 2017 年 30卷 9期