目的 建立荧光显微镜自动化检测血液残留白细胞的方法.方法 用不同浓度的残留白细胞[ (1-150) 个/μL]对LEICA-DM6000B荧光显微镜做放大倍数、荧光试剂配方、样品与试剂比例等参数优化及精密度试验, 以ADAM白细胞计数仪做参比配对验证准确度试验.结果 LEICA-DM6000B荧光显微镜放大倍数选100倍形成88个图谱保存电脑;荧光试剂配方:碘化丙啶 (PI) 含量4 mg％ (W/V), 吐温含量0.60％ (V/V);红细胞样品与荧光试剂比例为1:14, 曝光时间选择591 ms;血小板样品与荧光试剂比例为1:4, 曝光时间选择329 ms;红细胞样品与荧光试剂混合后取样量100μL;加入Nageotte计数板上静置时间选择20 min;Z轴调节上下范围 (97±40) μm;避光保存2年的试剂检测残留白细胞值无明显变化 (P>0.05);红细胞和血小板样品均为残留白细胞精密度<15％;LEICA-DM6000B荧光显微镜与ADAM计数仪配对检测残留白细胞相关性:红细胞样品为y=0.978 9x+0.381 6, r=0.9951 (P>0.05), 血小板样品为Y=0.985 3X+0.494 2, r=0.996 9 (P>0.05).结论 采用荧光显微镜自动检测白细胞计数, 准确、省工省时、检测费用低, 克服了人为差错, 并实现数据图像存档, 有助于减少临床输血不良反应, 保证临床输血的有效性及安全性.
作者：王珺；王兆福；程四国；刘玉振；王媛
来源：中国输血杂志 2019 年 32卷 2期
