目的 探讨微小RNA(miRNA)-570对腺苷三磷酸(ATP)合成酶G亚基因(ATP5L)基因表达的影响及miRNA调控血小板凋亡的分子机制.方法 依据NCBI数据库中NM_006476.5人的序列分别合成ATP5L3'端非翻译区(UTR)的野生型(WT)序列和突变型(MT)序列(488 bp),通过在序列两端增加限制酶酶切位点,与双荧光素酶报告基因载体(psiCHECKTM-2)质粒连接,分别构建含有ATP5L 3'UTR的WT和MT的双荧光素酶报告基因载体.依据miRNA数据库中MI0003577人的序列分别合成miRNA-570序列和其阴性序列,分别与构建的双荧光素酶报告基因载体共转染293T细胞,依据转染物的不同将实验分为6组,实验组1:miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3'UTR-WT质粒;实验组2: miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3'UTR-MT质粒;阴性对照组1:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-ATP5L-3'UTR-WT质粒;阴性对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-A TP5L-3'UTR-MT质粒;空白对照组1:miRNA-570序列和psiCHECK-2质粒;空白对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-2质粒.转染48 h后利用生物发光检测仪检测转染细胞的相对荧光强度.收集单采血小板60 mL,利用脂质体方法转染血小板,依据转染物的不同,将实验分为4组,实验组A: miRNA-570序列;阴性对照组B:miRNA-570阴性对照序列;空白对照组

作者：盖厦；李晓华；徐慧聪；叶辉；谯铭铭；姬艳博；于媛；陈元锋；庄云龙

来源：中国输血杂志 2020 年 33卷 3期