目的构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(HSV1-tk)基因的逆转录病毒重组载体pLXSN-TK.方法设计一对寡核苷酸引物,用PCR方法从质粒pHSV106中特异扩增HSV-tk基因片段(1 168bp),分别用BamHI和EcoRI酶切后,定向连接到质粒pLXSN中,转化宿主菌TG1,分别用上述内切酶,PCR和DNA测序鉴定重组质粒.结果酶切鉴定所切下的片段和PCR扩增的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致,证实符合表达框架.结论成功构建了HSV-tk嵌合重组质粒pLXSN-TK.
作者:陈建波;罗一鲁;郭忠敏;陈系古
来源:中国实验动物学报 2002 年 10卷 1期